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07月01日lncRNA测序分析(lncRNA的研究方法有哪些)

导读 导读 大家好,今天小六子来为大家解答以下的问题,关于lncRNA测序分析,lncRNA的研究方法有哪些这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看...
导读 大家好,今天小六子来为大家解答以下的问题,关于lncRNA测序分析,lncRNA的研究方法有哪些这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!1、

大家好,今天小六子来为大家解答以下的问题,关于lncRNA测序分析,lncRNA的研究方法有哪些这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!

1、研究方法很多,看你出于什么实验目的,如果从零开始,可以按照这篇文章的技术路线进行设计实验:lncRNA研究策略转载请注明来自丁香园 发布日期:2012-09-21 14:47 文章来源:丁香园 分享到: 收藏夹 新浪微博 腾讯微博 开心网 豆瓣社区 人人网 关键词: RNA miRNA 技术专题 锐博生物 丁香通 丁香园   点击次数:3447差异表达筛选通过lncRNA芯片或RNA-seq测序等方法对多对疾病模型和对照样本组织进行lncRNA表达谱分析。

2、2、生物信息分析通过生物信息学的方法筛选出具有表达差异的lncRNA,构建共表达网络,预测lncRNA的靶基因。

3、3、细胞分子水平研究(1)功能获得性研究:构建lncRNA过表达载体(2)功能缺失性研究:可通过siRNA、shRNA、反义核酸等方法沉默lncRNA,干预lncRNA后检测其对疾病相关基因表达的影响和对细胞表型如增值、凋亡、侵袭、转移等的影响(3)可通过RNA pull down、RNA-RIP、ChIRP-seq等方法检测与lncRNA结合的DNA、RNA、蛋白质。

4、4、动物实验(1)构建移植瘤或原位瘤模型,转移模型(2)导入siRNA或者lncRNA表达质粒(3)检测肿瘤生长曲线(4)通过免疫组化、RT-PCR、Western Blot等方法检测相关指标变化。

5、小知识RNA-RIP技术(RNA Binding Protein Immunoprecipitation)是一种高通量检测细胞内RNA与蛋白结合情况的技术,运用针对目标蛋白的抗体把相应的RNA-蛋白复合物沉淀下来,然后经过分离纯化就可以对结合在复合物上的RNA进行分析。

6、RIP技术下游结合microarray技术被称为RIP-Chip,帮助我们更高通量地了解癌症以及其它疾病整体水平的RNA变化。

7、CHIRP-Seq( Chromatin Isolation by RNA Purification )是一种检测与RNA绑定的DNA和蛋白的高通量测序方法。

8、方法是通过设计生物素或链霉亲和素探针,把目标RNA拉下来以后,与其共同作用的DNA染色体片段就会附在到磁珠上,最后把染色体片段做高通量测序,这样会得到该RNA能够结合到在基因组的哪些区域;如果结合物是蛋白质,可以通过将蛋白质打断成短肽再通过质谱进行鉴定,从而或者与RNA结合的蛋白质。

9、RNA Pull down技术与此类似。

本文分享完毕,希望对你有所帮助。

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